凝胶过滤层析的原理是什么?( 二 ) _凝胶层析的应用

如果将这样的凝胶装入一个足够长的柱子中，作成一个凝胶柱。当含有大小不同的蛋白质样品加到凝胶柱上时，比凝胶柱平均孔径小的蛋白质就要连续不断地穿入珠子的内部，这样的小分子不但其运动路程长，而且受到来自凝胶珠内部的阻力也很大，所以越小的蛋白质，把它们从柱子上洗脱下来所花费的时间越长。
凝胶层析分离物质，有什么优缺点？

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凝胶层析操作简便，所需设备简单。有时只要有一根层析柱便可进行工作。
分离介质—凝胶完全不需要像离子交换剂那样复杂的再生过程便可重复使用。
2.分离效果较好，重复性高。最突出的是样品回收率高，接近100% 。3.分离条件缓和。凝胶骨架亲水，分离过程又不涉及化学键的变化，所以对分离物的活性没有不良影响。
4.应用广泛。适用于各种生化物质，如肽类、激素、蛋白质、多糖、核酸的分离纯化、脱盐、浓缩以及分析测定等。分离的分子量范围也很宽，如SephadexG类为102～105d；Sepharose类为105～108d 。
5.分辨率不高，分离操作较慢。由于凝胶层析是以物质分子量的不同作为分离依据的，分子量的差异仅表现在流速的差异上，所以分离时流速必须严格把握。因而分离操作一般较慢。
而且对于分子量相差不多的物质难以达到很好的分离。此外，凝胶层析要求样品粘度不宜太高。凝胶颗粒有时还有非特异吸附现象。
凝胶层析实验报告结果分析是什么？

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凝胶层析实验报告结果分析是相对分子质量大的先出来，小的后出来，血红蛋白呈现红色，当红色带下移到下端口时开始收集，可以收集到血红蛋白。交联葡聚糖凝胶的市售商品多为干燥颗粒，使用前必须充分溶胀。
方法是将欲使用的干凝胶缓慢地倾倒入5～10倍的去离子水中，参照相关资料中凝胶溶胀所需时间，进行充分浸泡，然后用倾倒法除去表面悬浮的小颗粒。
分类：葡聚糖凝胶中最常见的是Sephadex 系列，它是葡聚糖与3－氯－1 ， 2环氧丙烷(交联剂)相互交联而成，交联度由2环氧丙烷的百分比控制。Sephadex 的主要型号是G-10 ~ G-200 ，后面的数字是凝胶的吸水率(单位是mL / g 干胶)乘以10 。Sephadex G-50 ，表示吸水率是5mL/g 干胶。Sephadex 的亲水性很好，在水中极易膨胀，不同型号的Sephadex 的吸水率不同，它们的孔穴大小和分离范围也不同。
数字越大的，排阻极限越大，分离范围也越大。Sephadex 中排阻极限最大的G-200为8×10 。