96孔细胞培养板的平底和圆底培养板的区别和选择( 二 )


10000/ml,结果就很好 。当然细胞数也不能太多,这其实取决于你细胞的生长速度,生长快的细胞,可接种浓度低点 。这主要是使细胞增殖率不致受处理因素之外的其他因素影响,比
如接触抑制,营养竞争 。总之,做MTT时细胞数应较低,目的就是为了排除其他因素的影响,以使每孔细胞生长情况尽可能地反映出处理因素的影响 。细胞接种的浓度和你的实验目的、要求、细胞种类、处理因素的特殊要求都有关系 。没有简单的,每孔接种多少的一个标准 。当然,可以用楼上建议的浓度开
始摸索 。同时,注意肿瘤细胞核正常细胞的生长数度也不一样,前者生长快,后者慢,细胞数的量也有讲究 。到底多少合适,得根据你的实验具体要求来摸索 。我做
b16转染时,因为脂质体要求细胞融合度为30%-50%,曾经没孔接种过300-500个细胞,效果非常好,
做MTT时,96孔培养板细胞浓度该是多少悬浮细胞通常是4x10 4/ml,帖壁细胞通常是5x10 4/ml
产生差别的原因有多种 。
1.在加细胞时,细胞沉淀下来,导致两孔细胞数不同 。我们通常用磁力转子对细胞缓慢搅拌,时刻保持细胞处于悬浮状态 。
2.96孔板在培养箱中,由于湿度不够,而培养箱由于具有一定的温度,使得边缘的孔水分蒸发较快,导致培养基中各种成分浓度变化增大,导致细胞状态不同 。对于这种现象,要保证培养箱中的湿度,减少开关培养箱的次数和时间 。
测生长曲线,96孔细胞培养板每孔加多少细胞合适不同的细胞生长速度也不一样,为了在测定期间细胞不致于长满全孔,最好以较少量的细胞接种.建议先做个预试验,以不同密度梯度的细胞数量接种细胞板孔,看多大接种密度细胞会在测定期内长满细胞板孔,选择比此密度稍低的接种量就可以了.原来做过CHO的,好像是5天的测定期,2500~3500 cells/孔就行.
酶活实验96孔板的选择(酶标仪)我们实验室检测LacZ,BCA测蛋白浓度的吸光值时用的酶标板就是康宁的96孔细胞培养板(可以培养贴壁细胞,应该是处理过的吧),你做得少的话直接换个新的96孔板就ok了,不需要特别的处理,用完后用dH2O洗洗还可以重复用,挺方便的 。当然如果实验比较精细的话你可能得考虑买个专业点的了
测生长曲线,96孔细胞培养板每孔加多少细胞合适【96孔细胞培养板的平底和圆底培养板的区别和选择】不同的细胞生长速度也不一样,为了在测定期间细胞不致于长满全孔,最好以较少量的细胞接种 。建议先做个预试验,以不同密度梯度的细胞数量接种细胞板孔,看多大接种密度细胞会在测定期内长满细胞板孔,选择比此密度稍低的接种量就可以了 。原来做过CHO的,好像是5天的测定期,2500~3500 cells/孔就行 。